Jack (Kiefer Sutherland) und Teri Bauer (Leslie Hope) sind wieder glücklich vereint, nachdem sie sich für eine kurze Zeit getrennt hatten. Lediglich die Tochter Kim (Elisha Cutbert) hat noch immer Probleme mit dieser kurzzeitigen Trennung. Es ist Mitternacht als die Eltern auf einmal bemerken, dass Kim aus dem Haus geschlichen ist. Im gleichen Moment erhält Jack einen Anruf von seinem Chef. Er wird umgehend an seinen Arbeitsort beim CTU, einer Anti-Terror-Einheit, einberufen.
Er erfährt dort, dass in den nächsten 24 Stunden ein Attentat auf den Präsidentschaftskandidat Palmer (Dennis Haysbert) geplant ist. Sofort nimmt Bauer mit seinem Team die Ermittlungen auf, wobei er schon im vornerein weiss, dass er nicht einmal seinen engsten Arbeitskollegen trauen kann. Doch Jack ahnt zu diesem Zeitpunkt noch nicht, dass dieser Tag noch viel mehr unerwartetes bereit hält und dass auch seine Familie in grosser Gefahr ist...